實時熒光定量PCR注意事項

　　1.按照正確的開關機順序操作,有助于延長儀器的使用壽命,減少儀器出故障的頻率.開機順序：先開電腦,待電腦*啟動后再開啟定量PCR儀主機,等主機面板上的綠燈亮后即可打開定量PCR的收集軟件,進行實驗.關機順序：確認實驗已經結束后,首先關閉信號收集軟件,然后關掉定量PCR儀主機的電源,關閉電腦.

　　2.應該定期備份您的實驗數據,備份頻率推薦每周一次,用光盤刻錄.同時您也應該備份定量PCR儀的各種純熒光光譜校正文件、背景文件和安裝驗證實驗數據,這些文件所在的目錄是C：/Appliedbiosystems/SDSDocument.

　　3.良好的實驗室環境有助于延長儀器的使用壽命,減少儀器出故障的頻率.推薦做到以下幾個方面：

　　電源：推薦配備合適的UPS或穩壓器.

　　通風：儀器的通風應該沒有阻擋.

　　溫度：推薦實驗室配備空調,溫度應該控制在10-30°C之間.

　　濕度：20-80%；對于潮濕的省份,推薦實驗室配備除濕機.

　　空間：易于操作,安全.

　　4.怎樣判斷定量PCR儀的樣本加熱塊是否被污染?怎樣清除污染

　　一個辦法是運行背景校正反應板,當一個或多個反應孔連續顯示出不正常的高信號,則表明該孔可能被熒光污染物.另外一種辦法是在不放任何物品到樣本塊上的前提下,執行ROI的校正,當某個孔的信號明顯高出其他孔時,則表明該孔被污染.

　　清除樣本加熱塊污染的步驟如下：用移液器吸取少量乙醇并滴入每個污染的反應孔中.吹打數次.將廢液吸入廢液杯中.重復以上步驟：乙醇三次,去離子水三次.確認反應孔中的殘留液體蒸發完.